細胞培養の注意事項
細胞培養の注意事項
(1) ある細胞を初めて培養する場合、まず細胞名を検索して、培養液、血清、添加物、正常な消化時間、継代時間などの関連情報を理解する必要があります。初代培養細胞として）、より正確な培養方法を得るために関連文献を参照する必要があります。
(2) 細胞間培養に入る場合は、次の手順に厳密に従う必要があります。
① セル操作のためのすべての溶液と消耗品が消毒され、問題なくテストされていることを確認してください。不確かな溶液や消耗品は使用しないでください。特別な状況でない限り、他の人のソリューションを借りないでください。
② 衣服の袖口はまくっているか、白衣の袖口は留めているか確認してください。
③アルコールランプ内のアルコール量を測定し、必要に応じて補充します。
④ 必要なすべての溶液と消耗品が手の届くところにあることを確認してください。片手でボトルのキャップを開けるために、実験前にすべてのボトルのキャップを緩めることができます。
⑤瓶の口がやけどしない限り、溶液を直接注がないようにしてください。注いで失敗し、溶液がボトルの口に付着した場合は、75% アルコールをスプレーしたペーパー タオルでボトルの口の周囲をきれいに拭き取り (ボトルの口には触れないでください)、火で燃やしてください。火炎。
⑥ 使用中の消耗品が使用中にきれいでない場合は、適時に交換する必要があります。
⑦ 実験終了後は片付けを行い、作業場を清潔に保ち、最後に75%アルコールでテーブルを拭きます。
(3) 細胞汚染の防止
① 実験用品は汚染を防いでいる。細胞培養に使用する試薬、消耗品、器具は十分に洗浄・消毒し、各種溶液の滅菌には細心の注意を払い、無菌試験で陰性となった後にのみ使用することができます。手術室と残りの無菌設備は、定期的に洗浄、消毒、滅菌する必要があります。
②運転中の汚染を防止する。
③静電気が発生しやすい、ホコリを吸着しやすい服装は、セルに入る前に白衣に着替えてください。
④実験開始前に、手袋に問題がないことを確認する必要があります。手袋がバイオ セーフティ キャビネットの外側の物体と接触している限り、手袋は時間内に消毒する必要があります。
⑤ 細胞培養室に入室後はドアを閉め、バイオセーフティキャビネットのエアカーテンに影響を及ぼさないよう、できるだけ座って歩かないようにしてください。作業前に、手とボトルのキャップをアルコール 75% の綿球で拭いてください。事前に使用する装置、溶液、細胞を厳密に確認してください。大規模な汚染を避けるために、汚染された物品または滅菌されていない物品を無菌室に持ち込まないでください。
⑥ 細胞の働きが軽いこと。ボトルの口は炎の周りの無菌領域で開く必要があり、ボトルの口は簡単に回転して燃焼させるために炎の周りに配置する必要があります。炎がペットボトルの口を焦がさないように注意してください。
⑦ 実験操作中は安全キャビネットの仕切りをできるだけ低くし、会話を最小限に抑えます。くしゃみや咳をするときは、不必要な汚染を避けるために、作業エリアに面してはいけません。
⑧ 誤操作によるボトルキャップの汚れを防ぐため、ボトルキャップは上下逆さまにしてご使用ください。
⑨衣服に未知の物体が落ちることによる細胞汚染を避けるため、開いた容器の上を通過しないでください。
⑩ 実験操作中は、パスツールピペット、ピペットヘッド、ピペットの適時交換に注意し、1本のパイプを最後まで実施しないこと。汚れた、または不確定な物品と接触した場合、それらは直接廃棄する必要があります。実験後は、実験室を清潔に保つために、時間内に清掃する必要があります。最後に、テーブルトップを 75% アルコールで拭きます。
(4) 細胞のクロスコンタミネーションを防ぐ
①様々な細胞培養操作を行う場合、使用する器具を厳密に区別し、識別できるように印をつけた方がよい。操作は順番に実行され、一度に 1 つのセルのみが処理されます。複数のセルと複数の操作が一緒に実行されると、混乱が発生する可能性があります。
② 液交換や継代操作中は、ピペットヘッドや細胞を取り付けたピペットが試薬瓶の口に触れないようにし、細胞を培地に持ち込んで他の細胞を汚染しないようにしてください。
③細胞は、購入、他所からの導入、自己樹立後、適時保存・冷凍すること。汚染された場合、細胞を蘇生させ、培養を続けることができます。